一、兩種方(fang)法的基本原理

1、生化培養箱的多管發酵法

 生化(hua)培(pei)(pei)養(yang)箱(xiang)初發酵(jiao)的實驗：生化(hua)培(pei)(pei)養(yang)箱(xiang)的發酵(jiao)管內裝有單倍或三倍乳糖蛋(dan)白(bai)(bai)胨培(pei)(pei)養(yang)液(ye)，并在內倒置有小的玻璃管。每個樣(yang)品(pin)都使用三個不同的水(shui)樣(yang)量接(jie)(jie)種，相同的接(jie)(jie)種水(shui)樣(yang)量要有五管，將水(shui)樣(yang)分別接(jie)(jie)種到裝有乳糖蛋(dan)白(bai)(bai)胨培(pei)(pei)養(yang)液(ye)的發酵(jiao)管中(zhong)，在37℃±0.5℃下培(pei)(pei)養(yang)24h±2h。

 乳(ru)(ru)糖能(neng)起到選擇的作用，因為(wei)(wei)許多**都不(bu)(bu)能(neng)發(fa)酵乳(ru)(ru)糖，而大(da)腸(chang)菌(jun)群能(neng)夠發(fa)酵乳(ru)(ru)糖并且產(chan)酸(suan)產(chan)氣(qi)(qi)。培養(yang)(yang)液中加(jia)入溴甲酚紫作為(wei)(wei)酸(suan)度指示劑(ji)，**產(chan)酸(suan)后(hou)，培養(yang)(yang)液即由原來(lai)的紫色(se)變成黃色(se)。產(chan)酸(suan)產(chan)氣(qi)(qi)的發(fa)酵管表明(ming)試(shi)驗陽性(xing)，如在倒管內產(chan)氣(qi)(qi)不(bu)(bu)明(ming)顯(xian)，可輕拍發(fa)酵管，有小氣(qi)(qi)泡升起為(wei)(wei)陽性(xing)。

 生化培養(yang)箱復(fu)發酵的(de)(de)實驗  輕微振蕩初發酵試驗陽性結(jie)果(guo)的(de)(de)發酵管，用3mm接種環將(jiang)培養(yang)物（2-3環）轉(zhuan)接到EC培養(yang)液中，在44.5℃±0.5℃下培養(yang)24h±2h（提高(gao)培養(yang)溫(wen)度(du)可造成不利于來自自然環境(jing)的(de)(de)大(da)腸菌群(qun)的(de)(de)生長）。培養(yang)后立即觀察，發酵管產氣(qi)則(ze)證實為糞大(da)腸菌群(qun)陽性。

2、生化培養箱的(de)濾(lv)膜法(fa)

 濾膜(mo)(mo)是一種微孔性(xing)濾膜(mo)(mo)，孔徑0.45μm。將水(shui)樣(yang)注入已(yi)**的放有濾膜(mo)(mo)的過濾器中，經過抽濾，**即被截留(liu)在(zai)膜(mo)(mo)上，然(ran)后將濾膜(mo)(mo)貼于M-FC培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)上，在(zai)44.5℃±0.5℃下(xia)(xia)培(pei)養(yang)(yang)(yang)24 h±2h。糞大(da)腸(chang)菌群(qun)菌落(luo)在(zai)M-FC培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)上呈藍色或(huo)藍綠色，其(qi)他非(fei)糞大(da)腸(chang)菌群(qun)菌落(luo)成灰色、淡黃色或(huo)無色。正(zheng)常情況下(xia)(xia)，由(you)于溫(wen)度(du)和玫(mei)瑰酸鹽試劑的選擇(ze)性(xing)作用，在(zai)M-FC培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)上很少見到非(fei)糞大(da)腸(chang)菌菌落(luo)。

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